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NanoDrop Eight是賽默飛公司推出的八通道微量紫外-可見分光光度計，它繼承了NanoDrop系列的超微量檢測優(yōu)勢，并在通量和自動化方面實現(xiàn)突破。該設備能在1–2 μL的樣品體積下快速完成核酸、蛋白質等生物分子的濃度和純度分析，并支持八個樣品同時檢測。規(guī)范化的實驗流程不僅能保證結果準確可靠，還能提升實驗室的整體效率。
打開電源，確保系統(tǒng)正常啟動。
等待開機自檢完成，檢查光源狀態(tài)是否正常。
確認檢測平臺干凈無殘留液滴。
微量移液器及配套槍頭。
無核酸酶水或去離子水，用于清潔。
棉簽或無塵紙，用于擦拭檢測平臺。
樣品緩沖液或對照溶劑，作為空白對照。
核酸或蛋白樣品需溶于合適緩沖液。
確保樣品濃度處于NanoDrop Eight檢測范圍。
在檢測前輕輕混勻，避免沉淀和濃度梯度。
啟動NanoDrop Eight主機與操作軟件。
在界面中選擇實驗模式，例如核酸定量、蛋白檢測或全光譜掃描。
使用溶解樣品的緩沖液作為空白。
在檢測平臺上加1–2 μL空白液，關閉上臂，點擊“Blank”。
系統(tǒng)自動完成背景吸收扣除。
在檢測位置依次滴加樣品，每個位置1–2 μL。
放下上臂，點擊“Measure”，儀器會依次完成八個通道的檢測。
軟件自動顯示濃度、260/280比值、260/230比值以及完整光譜。
若樣品數量大于八個，可分批次進行。
每批次檢測前均需重新進行空白測定，以保證準確性。
每次測定結果自動記錄，可批量導出為Excel、PDF等格式。
可直接上傳至實驗室信息管理系統(tǒng)，實現(xiàn)集中管理。
濃度：根據A260值計算DNA或RNA濃度。
純度：260/280比值判斷蛋白污染；260/230比值判斷鹽類或酚污染。
光譜曲線：完整掃描幫助確認是否存在雜質峰。
A280法：直接檢測芳香族氨基酸吸收。
比色法：結合Bradford或BCA方法，利用標準曲線定量。
RSD（相對標準偏差）<2%通常代表結果重復性良好。
若出現(xiàn)異常比值或光譜，應重新檢測并檢查樣品質量。
加樣準確：移液操作需穩(wěn)準，保證樣品完全覆蓋光學平臺。
防止交叉污染：每次檢測后必須清潔平臺，避免殘留干擾。
空白選擇：必須與樣品溶劑一致，否則會引入系統(tǒng)誤差。
環(huán)境要求：保持實驗室溫度穩(wěn)定，避免強光直射。
重復檢測：關鍵樣品建議至少三次測量取均值。
使用標準濾光片進行波長校準。
使用標準吸光度溶液進行光度校準。
每次開機后，系統(tǒng)自動執(zhí)行光源和光學檢測。
若提示異常，應停止實驗并聯(lián)系維護人員。
每次實驗后用去離子水擦拭平臺。
避免使用腐蝕性清潔劑，以免損壞光學部件。
定期更換易耗部件（如光源），保證長期穩(wěn)定性。
使用TE緩沖液作為空白。
測量結果：濃度符合轉染要求時可直接使用；若260/280比值偏低，應進一步純化。
空白為無RNA酶水。
結果中若260/230比值低，提示鹽或酚污染，需要重復提取或純化。
空白為PBS緩沖液。
通過A280法檢測蛋白濃度，并結合比色法交叉驗證。
NanoDrop Eight相比傳統(tǒng)單通道儀器，通量更高，效率提升顯著。
微量加樣對操作者要求較高，操作熟練后可大幅提高重復性。
在高通量測序建庫前，利用NanoDrop快速篩選RNA樣品，能有效節(jié)省測序成本。
教學中使用NanoDrop Eight，學生能直觀理解核酸和蛋白質的吸收特性，實驗興趣更高。
數據導出與LIMS對接，使實驗室管理更加高效。
隨著實驗室智能化的發(fā)展，NanoDrop Eight的實驗流程有望進一步簡化與升級：
自動化加樣系統(tǒng)：減少人工誤差。
智能算法輔助：自動識別異常光譜并給出修正建議。
遠程數據監(jiān)控：實驗結果可實時上傳云端，便于多團隊共享。
集成質控模塊：未來或可在每次檢測時自動執(zhí)行精度驗證。
NanoDrop Eight為核酸、蛋白及多種生物樣品提供了快速、準確和高效的檢測手段。規(guī)范化的實驗流程涵蓋了從樣品準備、檢測操作到結果解讀的完整步驟。通過嚴格的質量控制和合理的實驗設計，該設備不僅提升了實驗效率，也保證了檢測結果的可靠性。對于現(xiàn)代分子生物學實驗室而言，NanoDrop Eight已成為不可或缺的核心檢測平臺。
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