賽默飛分光光度計 NanoDrop Eight 檢測范圍詳解

一、引言

NanoDrop Eight 是賽默飛世爾推出的多通道微量紫外-可見分光光度計，繼承了 NanoDrop 系列的核心技術(shù)，并在高通量檢測和數(shù)據(jù)一致性方面做了進一步優(yōu)化。其最大的特點是無需比色皿和額外試劑，直接利用超微量樣品即可完成快速檢測。隨著分子生物學(xué)、醫(yī)學(xué)研究以及臨床檢測需求的不斷增加，NanoDrop Eight 在科研與應(yīng)用檢測中的重要性日益凸顯。理解其檢測范圍是正確使用設(shè)備、獲得可靠實驗數(shù)據(jù)的關(guān)鍵。

二、光譜檢測范圍

1. 波長覆蓋范圍
   NanoDrop Eight 的光譜檢測區(qū)間為 190 nm – 850 nm，涵蓋紫外區(qū)與可見光區(qū)：

• 190–230 nm：適合檢測短波紫外吸收，如蛋白質(zhì)中肽鍵和芳香族殘基。

• 230–280 nm：核酸、蛋白質(zhì)主要吸收區(qū)，A260 用于核酸定量，A280 用于蛋白質(zhì)定量。

• 320–850 nm：適用于染料、標(biāo)簽分子、細胞懸液以及部分納米材料的檢測。

2. 光譜分辨率
   儀器采用高性能光學(xué)系統(tǒng)，分辨率可達 1.0 nm，能分辨相近吸收峰。

3. 波長準(zhǔn)確性
   誤差一般小于 ±1 nm，保證了光譜掃描的精確性。

三、濃度檢測范圍

NanoDrop Eight 具有寬廣的濃度檢測范圍，這是其區(qū)別于傳統(tǒng)分光光度計的優(yōu)勢。

1. 核酸檢測范圍

• DNA、RNA：2 – 27,500 ng/μL

• 脫鹽寡核苷酸：6 – 7500 ng/μL
  該范圍幾乎覆蓋了從痕量樣品到高濃度提取液的所有實驗需求。

2. 蛋白質(zhì)檢測范圍

• 使用 A280 吸收法：0.06 – 370 mg/mL

• 使用 BCA、Bradford 等染料法時，儀器同樣可在 0.01 – 200 mg/mL 范圍內(nèi)檢測。

3. 其他生物分子

• 熒光染料標(biāo)記物：如 Cy3、Cy5、FITC，在 450–650 nm 區(qū)間均可準(zhǔn)確檢測。

• 細胞與顆粒：可通過 600–850 nm 范圍內(nèi)的散射和吸收信號進行定量。

四、樣品檢測范圍

1. 樣品體積
   NanoDrop Eight 只需 1–2 μL 樣品即可完成檢測，顯著節(jié)省了珍貴實驗樣品。

2. 樣品類型

• 核酸（DNA、RNA、寡核苷酸）

• 蛋白質(zhì)（純化產(chǎn)物、粗提液、復(fù)合物）

• 標(biāo)記分子（熒光染料、納米顆粒）

• 細胞懸液、組織裂解液

• 藥物制劑、臨床樣本

3. 濃度與純度判定

• A260/A280 比值：用于核酸純度判斷。

• A260/A230 比值：評估蛋白質(zhì)或有機物污染。