NanoDrop Eight 是賽默飛(Thermo Fisher Scientific)推出的一款多通道微量分光光度計(jì),承襲了 NanoDrop 系列的微量檢測(cè)優(yōu)勢(shì),同時(shí)引入高通量設(shè)計(jì),可一次性檢測(cè)多達(dá)八個(gè)樣品,廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)、基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、臨床研究和藥物開(kāi)發(fā)等領(lǐng)域。
與傳統(tǒng)比色皿分光光度計(jì)相比,NanoDrop Eight 最大的特點(diǎn)是只需 1–2 μL 樣本即可完成檢測(cè),避免了樣本稀缺時(shí)的浪費(fèi),同時(shí)極大提升了檢測(cè)速度和效率。本文將從實(shí)際使用的角度,對(duì) NanoDrop Eight 的使用體驗(yàn)進(jìn)行全面總結(jié)。
NanoDrop Eight 延續(xù)了 NanoDrop 系列小巧緊湊的設(shè)計(jì)風(fēng)格。機(jī)身占地面積小,適合放置在實(shí)驗(yàn)臺(tái)一角,不會(huì)占據(jù)過(guò)多空間。其檢測(cè)平臺(tái)采用易于清潔的不銹鋼和光學(xué)窗口組合,檢測(cè)后可直接用去離子水或無(wú)絨紙巾清潔,維護(hù)便捷。
最大的體驗(yàn)升級(jí)在于 多通道設(shè)計(jì)。傳統(tǒng) NanoDrop 只能單樣品逐個(gè)檢測(cè),而 NanoDrop Eight 可以同時(shí)加載 8 個(gè)樣品,實(shí)現(xiàn)批量檢測(cè)。這對(duì)處理高通量核酸或蛋白質(zhì)樣本的實(shí)驗(yàn)室來(lái)說(shuō),顯著縮短了工作時(shí)間。
配套軟件界面直觀,支持觸摸屏或電腦端操作。常見(jiàn)檢測(cè)模式如 核酸、蛋白質(zhì)、寡核苷酸 均有預(yù)設(shè)模板,用戶只需選擇合適的模式即可快速開(kāi)始檢測(cè)。軟件還提供實(shí)時(shí)數(shù)據(jù)顯示、自動(dòng)生成報(bào)告和數(shù)據(jù)導(dǎo)出功能,便于實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)管理和歸檔。
不需要比色皿或試管,減少耗材使用。
樣品用量極少,1–2 μL 即可完成檢測(cè)。
檢測(cè)速度快,幾秒鐘即可完成一個(gè)樣品的測(cè)量。
NanoDrop Eight 對(duì)核酸樣本的檢測(cè)體驗(yàn)良好。A260 測(cè)量靈敏度高,常見(jiàn)的 DNA、RNA 樣本濃度在 2–15,000 ng/μL 范圍內(nèi)均可準(zhǔn)確測(cè)量。檢測(cè)后可直接得到濃度和純度比值:
A260/A280 用于判斷蛋白質(zhì)污染;
A260/A230 用于判斷鹽類或有機(jī)溶劑殘留。
在日常核酸提取實(shí)驗(yàn)中,NanoDrop Eight 能快速判斷樣品是否適合下游實(shí)驗(yàn)(如 PCR、轉(zhuǎn)錄組測(cè)序),極大提高了實(shí)驗(yàn)效率。
RNA 檢測(cè)對(duì)樣品純度要求較高,NanoDrop Eight 的多通道檢測(cè)使得在大規(guī)模 RNA 提取實(shí)驗(yàn)中可以快速篩選樣品質(zhì)量,理想的 A260/A280 比值在 2.0 左右。如果發(fā)現(xiàn)偏離,可以立即進(jìn)行樣品純化,避免浪費(fèi)下游實(shí)驗(yàn)資源。
NanoDrop Eight 提供了 A280 法和染料法兩種模式。
A280 法:適合檢測(cè)純化蛋白,幾乎不需額外試劑。
染料法:如 Bradford 或 BCA,適合低濃度蛋白質(zhì)檢測(cè),但需要建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
多通道的優(yōu)勢(shì)在于能夠同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣品,避免因單樣品操作耗時(shí)而延誤實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。
除核酸和蛋白質(zhì)外,NanoDrop Eight 還可用于檢測(cè)寡核苷酸、細(xì)胞裂解液、多肽溶液等。實(shí)驗(yàn)人員可以根據(jù)樣品特點(diǎn)自定義方法,實(shí)現(xiàn)更廣泛的應(yīng)用。
在使用體驗(yàn)中,NanoDrop Eight 能夠準(zhǔn)確檢測(cè)極低濃度樣品(如 2 ng/μL 的 DNA),同時(shí)在高濃度范圍內(nèi)仍保持良好的線性。
相同樣品在不同通道重復(fù)檢測(cè)時(shí),差異極小,證明其光學(xué)系統(tǒng)和多通道設(shè)計(jì)的穩(wěn)定性可靠。
一次可檢測(cè)八個(gè)樣品,相比傳統(tǒng)逐一檢測(cè),時(shí)間節(jié)省 70% 以上。尤其在大規(guī)模核酸提取和質(zhì)控環(huán)節(jié),效率優(yōu)勢(shì)顯著。
樣品體積應(yīng)嚴(yán)格控制在 1–2 μL。
樣品需澄清無(wú)沉淀,否則會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)異常。
濃度過(guò)高時(shí)可適當(dāng)稀釋,保持在儀器的線性檢測(cè)范圍內(nèi)。
檢測(cè)前應(yīng)先進(jìn)行空白參比,確保基線準(zhǔn)確。
使用相同緩沖液作為對(duì)照,避免背景差異。
每次檢測(cè)后立即清潔檢測(cè)平臺(tái),防止交叉污染。
軟件可自動(dòng)生成標(biāo)準(zhǔn)報(bào)告,但建議實(shí)驗(yàn)人員同時(shí)保存原始光譜曲線。
對(duì)大規(guī)模樣本,可利用軟件的批量導(dǎo)出功能,減少手工記錄錯(cuò)誤。
質(zhì)粒 DNA 的濃度和純度檢測(cè)可在幾分鐘內(nèi)完成,大幅提高克隆效率。
大規(guī)模 RNA 樣本檢測(cè)中,NanoDrop Eight 的多通道優(yōu)勢(shì)尤為突出,可以快速完成 RNA 質(zhì)量篩查。
在蛋白純化與定量實(shí)驗(yàn)中,NanoDrop Eight 能提供快速初步定量結(jié)果,便于后續(xù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。
NanoDrop Eight 可用于檢測(cè)臨床樣本中核酸濃度,或藥物研發(fā)中對(duì)生物樣品的初步定量分析。
檢測(cè)結(jié)果偏高或偏低
可能原因:樣品中有污染或體積不足。
解決方法:檢查樣品純度,確保加樣準(zhǔn)確。
重復(fù)性差
可能原因:樣品未混勻或檢測(cè)平臺(tái)未清潔。
解決方法:檢測(cè)前充分混勻,及時(shí)清潔平臺(tái)。
沒(méi)有讀數(shù)
可能原因:樣品濃度過(guò)低。
解決方法:提高濃度或換用染料法檢測(cè)。
A260/A280 比值異常
可能原因:存在蛋白質(zhì)或酚污染。
解決方法:重復(fù)提取或純化樣品。
NanoDrop Eight 在實(shí)驗(yàn)室中的應(yīng)用體驗(yàn)主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面:
高效性:多通道檢測(cè)顯著提升檢測(cè)速度,特別適合大規(guī)模項(xiàng)目。
節(jié)約性:樣本體積極低,減少寶貴樣本浪費(fèi)。
直觀性:結(jié)果實(shí)時(shí)顯示,快速判斷樣品質(zhì)量。
靈活性:可檢測(cè)核酸、蛋白質(zhì)、寡核苷酸等多類型樣本。
在未來(lái),NanoDrop Eight 的發(fā)展方向可能包括:
更高通量:擴(kuò)展通道數(shù)量,實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化檢測(cè)。
智能化數(shù)據(jù)分析:與實(shí)驗(yàn)室信息管理系統(tǒng)對(duì)接,支持 AI 自動(dòng)質(zhì)控。
更小體積樣品檢測(cè):實(shí)現(xiàn)低于 1 μL 的檢測(cè)需求。
跨平臺(tái)應(yīng)用:結(jié)合云端存儲(chǔ),實(shí)現(xiàn)遠(yuǎn)程數(shù)據(jù)共享。
賽默飛 NanoDrop Eight 分光光度計(jì)憑借 高通量、多通道、微量檢測(cè)、快速準(zhǔn)確 的優(yōu)勢(shì),為實(shí)驗(yàn)室核酸和蛋白質(zhì)檢測(cè)帶來(lái)了極大便利。從操作體驗(yàn)來(lái)看,其界面直觀、流程簡(jiǎn)便,檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定可靠,尤其適合需要批量處理樣本的科研和臨床實(shí)驗(yàn)室。通過(guò)合理的樣品制備、規(guī)范的操作流程以及優(yōu)化的數(shù)據(jù)管理,NanoDrop Eight 可以充分發(fā)揮性能,為科研工作提供高效、準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)支持。
全文約 3000 字,系統(tǒng)總結(jié)了 NanoDrop Eight 的 設(shè)計(jì)與操作體驗(yàn)、檢測(cè)體驗(yàn)、性能優(yōu)勢(shì)、優(yōu)化方法、應(yīng)用價(jià)值和未來(lái)方向,可作為實(shí)驗(yàn)室人員培訓(xùn)和使用參考。
杭州實(shí)了個(gè)驗(yàn)生物科技有限公司