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在紫外可見分光光度法實驗中，比色池是承載樣品的重要容器，其材質(zhì)、尺寸和透射性能直接影響測定結(jié)果的準(zhǔn)確性。賽默飛分光光度計BioMate 160作為一款高性能儀器，支持多種比色池的兼容使用。合理選擇比色池不僅能提高光譜測試的靈敏度和分辨率，還能保證實驗的重復(fù)性和科學(xué)性。本文將圍繞BioMate 160比色池的種類、適用范圍、選用原則、操作要點、常見問題及優(yōu)化策略進行全面闡述。
比色池（Cuvette）是一種透明的液體樣品盛放器，一般為方形或矩形，其作用是保證一定光程下的透射光通過溶液，從而依據(jù)比爾-朗伯定律實現(xiàn)濃度與吸光度的換算。
比色池的關(guān)鍵參數(shù)包括：
光程長度：常見為1 cm，也有0.2 cm、0.5 cm、2 cm、5 cm等規(guī)格。
材質(zhì)：石英、光學(xué)玻璃、塑料。
體積容量：微量型（數(shù)微升至百微升）、常規(guī)型（1–4 mL）、大容量型（>5 mL）。
透射范圍：由材質(zhì)決定透射波長區(qū)間。
波長適用范圍：190–2500 nm，覆蓋紫外、可見及部分近紅外。
優(yōu)點：透光性強、穩(wěn)定性好、耐酸堿、耐高溫。
缺點：價格較高，易碎。
應(yīng)用：核酸、蛋白質(zhì)、酶動力學(xué)、環(huán)境監(jiān)測中痕量分析。
波長適用范圍：320–2500 nm。
優(yōu)點：價格適中，適合可見光區(qū)域測定。
缺點：不適合紫外區(qū)檢測，易受酸堿腐蝕。
應(yīng)用：常規(guī)可見光實驗，如色素、無機離子定量。
波長適用范圍：340–800 nm。
優(yōu)點：一次性使用，避免交叉污染，價格低廉。
缺點：光學(xué)性能不穩(wěn)定，波長覆蓋范圍窄。
應(yīng)用：教學(xué)實驗、常規(guī)檢測、一次性樣品快速測定。
容量：一般為50–200 μL。
適用場景：珍貴樣品或核酸蛋白濃度較高的實驗。
特點：光程較短，需要儀器具備高靈敏度。
光程：2 cm、5 cm甚至10 cm。
適用場景：低濃度樣品檢測，提高信號強度。
注意事項：溶液均一性必須良好，否則易出現(xiàn)散射誤差。
依據(jù)波長范圍選擇材質(zhì)
若需紫外區(qū)測定（DNA、RNA濃度），必須使用石英比色池。
僅進行可見光分析（如比色法測定金屬離子），可使用光學(xué)玻璃比色池。
常規(guī)快速檢測，可用塑料比色池。
依據(jù)樣品體積選擇容量
樣品珍貴或量少：選擇微量比色池（50–200 μL）。
樣品充足：常規(guī)1 mL以上比色池。
依據(jù)濃度范圍選擇光程
高濃度樣品：選用短光程比色池（0.2–0.5 cm），避免吸光度超限。
低濃度樣品：選用長光程比色池（2–5 cm），提高檢測靈敏度。
依據(jù)實驗精度要求
高精度科研實驗：建議使用石英比色池。
教學(xué)或常規(guī)檢測：可選擇光學(xué)玻璃或塑料比色池。
清潔要求
每次使用后立即清洗，用蒸餾水或無水乙醇沖洗。
樣品有機溶劑時，可用丙酮或異丙醇清洗，但需避免殘留揮發(fā)物影響透光。
切勿用硬物擦拭，防止劃傷光學(xué)面。
存放要求
比色池必須存放于專用盒中，避免碰撞。
石英比色池避免長期暴露在強光下，以防光致變色。
操作規(guī)范
放置方向一致，避免光路差異。
比色池外壁必須擦干凈，避免水漬或指紋影響測光。
裝液體樣品時避免產(chǎn)生氣泡。
核酸檢測誤差大
原因：使用了光學(xué)玻璃比色池，其在260 nm透光性能差。
解決：更換為石英比色池。
低濃度樣品無法檢測
原因：選用光程過短的比色池。
解決：改用2–5 cm長光程比色池。
重復(fù)性差
原因：比色池未清潔或放置方向不一致。
解決：規(guī)范操作并統(tǒng)一方向。
光譜基線不穩(wěn)
原因：比色池表面存在劃痕或污染。
解決：更換完好比色池。
推薦：1 cm光程石英比色池或微量石英比色池。
理由：260 nm處需高透光率，且樣品量小。
推薦：光學(xué)玻璃比色池或石英比色池。
理由：主要在可見光區(qū)（562 nm、595 nm）檢測。
推薦：石英比色池。
理由：需長時間測定，石英材質(zhì)耐光照、穩(wěn)定性好。
推薦：2–5 cm長光程石英或光學(xué)玻璃比色池。
理由：低濃度污染物檢測需要增強信號。
推薦：塑料比色池。
理由：成本低、一次性，避免交叉污染。
制定比色池選擇標(biāo)準(zhǔn)
根據(jù)實驗類型，制定“樣品種類—波長范圍—比色池類型”的選擇表格。
配備多規(guī)格比色池
建議實驗室同時配備微量、常規(guī)和長光程比色池，以便靈活使用。
規(guī)范使用記錄
建立比色池使用臺賬，記錄每次使用情況和清洗情況。
定期檢測比色池狀態(tài)
通過空白溶液掃描，判斷比色池是否存在劃痕或吸收異常。
在分光光度法實驗中，比色池的選擇對實驗結(jié)果有著決定性影響。賽默飛BioMate 160因其高靈敏度和寬波長范圍，需要配合合適的比色池才能充分發(fā)揮性能。
核酸與紫外區(qū)分析必須使用石英比色池；
可見光常規(guī)實驗可用光學(xué)玻璃比色池；
教學(xué)和快速檢測適合塑料比色池；
微量和長光程比色池則滿足特殊需求。
科學(xué)合理地選擇和使用比色池，不僅能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性，還能延長儀器和耗材的使用壽命。對于BioMate 160的使用者來說，掌握比色池的選擇與操作要點，是開展高水平實驗的必修課。
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