賽默飛分光光度計 BioMate 160 使用注意事項

一、概述

賽默飛（Thermo Fisher Scientific）BioMate 160 分光光度計是一款廣泛應用于生命科學、醫(yī)學、環(huán)境監(jiān)測、藥物檢測及教學實驗的紫外-可見分光光度計。儀器操作簡便，檢測結(jié)果穩(wěn)定，但要獲得準確可靠的數(shù)據(jù)，必須嚴格遵循使用注意事項。本文將系統(tǒng)介紹從儀器準備到維護全過程中的操作要點，幫助實驗人員正確使用該設備，避免因操作不當導致的誤差或故障。

二、操作前的準備事項

1. 儀器環(huán)境要求

• 溫度與濕度：實驗室應保持在 20–25 ℃，濕度控制在 40%–60%。溫濕度過高會影響光學元件穩(wěn)定性，過低則可能產(chǎn)生靜電干擾。

• 電源穩(wěn)定性：電壓要求 220 V±10%，應避免電壓波動過大，必要時使用穩(wěn)壓電源。

• 環(huán)境光控制：避免強光直射或強烈散射光，以減少光學干擾。

• 防塵與通風：實驗室應清潔，儀器周圍保持通風，避免灰塵進入光學系統(tǒng)。

2. 儀器檢查

• 光源檢查：氘燈和鎢燈壽命有限，應定期檢查亮度和穩(wěn)定性。

• 比色皿槽檢查：確保比色皿槽內(nèi)無異物和污漬。

• 開機自檢：開機后觀察自檢結(jié)果，確認光源、檢測器和電路狀態(tài)正常。

3. 樣品準備

• 溶液澄清度：樣品必須澄清透明，若有渾濁需離心或過濾。

• 濃度范圍：吸光度宜控制在 0.1–1.0 范圍，過高需稀釋。

• 對照液準備：參比溶液與樣品溶劑必須一致，以保證校準準確。

• 避免氣泡：加樣時應避免產(chǎn)生氣泡，否則會影響光路。

三、使用過程中的注意事項

1. 開機與預熱

• 開機后應先選擇所需光源，并預熱 10–15 分鐘，使光源達到穩(wěn)定狀態(tài)。

• 不宜頻繁開關光源，以延長燈泡壽命。

2. 波長設定

• 波長應根據(jù)實驗要求準確設定。

• 波長校準應定期進行，防止偏差導致測定誤差。

3. 比色皿操作

• 使用石英比色皿進行紫外檢測，使用光學玻璃比色皿進行可見光檢測。

• 比色皿外壁必須保持清潔，無指紋、水滴或劃痕。

• 比色皿放入時方向需保持一致，以減少光程差異造成的誤差。

4. 空白校準

• 在正式測定前必須進行空白校準。

• 校準液體應為與樣品相同的溶劑或緩沖液。

5. 光度測定

• 樣品應迅速測定，避免因光照或氧化造成性質(zhì)改變。

• 對動力學實驗，應保持溫度恒定，保證曲線平滑。

• 多次測定時，樣品應充分混勻后再取用，避免濃度不均。

四、實驗優(yōu)化注意事項

1. 樣品優(yōu)化

• 對核酸和蛋白質(zhì)檢測，應保證純度，避免鹽離子或有機物干擾。

• 對細胞懸液，應在測定前輕輕混勻，避免沉降或團聚。

2. 操作優(yōu)化

• 每個樣品至少重復測量三次，取平均值。

• 在定量實驗中，應先繪制標準曲線，再對未知樣品進行計算。

• 對酶動力學實驗，應設定合適的采樣間隔。

3. 數(shù)據(jù)處理優(yōu)化

• 對核酸檢測，需同時記錄 A260、A280 和 A230，進行純度判斷。

• 對蛋白質(zhì)檢測，若采用染料法，應在合適波長（如 595 nm）檢測。

• 對生長曲線監(jiān)測，應定時測量 OD600，避免過度稀釋或濃縮。

五、維護與保養(yǎng)注意事項

1. 日常維護

• 每次實驗后，應及時清理比色皿槽，避免殘留液體腐蝕。

• 比色皿應用專用清潔液清洗，并避免接觸硬物劃傷。

• 光學窗口應用無塵布輕拭，嚴禁使用粗糙紙巾。

2. 定期維護

• 光源燈泡壽命有限，氘燈一般 1000 小時左右，應及時更換。

• 定期進行波長校正和光度校正，保證數(shù)據(jù)準確性。

• 定期檢查風扇與散熱口，防止灰塵堵塞。

3. 長期停用

• 若儀器長期停用，應切斷電源，覆蓋防塵罩。

• 光源應取下單獨保存，避免受潮或損壞。

六、常見問題的預防與處理

1. 吸光度異常偏高

• 預防：避免樣品過濃，確保比色皿干凈。

• 處理：適當稀釋樣品并重新測定。

1. 基線漂移

• 預防：保證光源充分預熱，保持比色皿清潔。

• 處理：重新進行空白校準。

1. 重復性差

• 預防：規(guī)范操作，避免樣品分層。

• 處理：重新混勻樣品，多次取樣測定。

1. 燈泡亮度不足

• 預防：減少頻繁開關燈源。

• 處理：更換氘燈或鎢燈。

1. 波長偏差

• 預防：定期進行校準。

• 處理：聯(lián)系專業(yè)人員進行維護。

七、實驗安全與管理注意事項

1. 實驗安全

• 操作人員需佩戴實驗服、手套和護目鏡。

• 對含有有毒或強腐蝕性樣品，應在通風櫥內(nèi)操作。

• 樣品溢出應立即清理，避免腐蝕比色皿或儀器。

2. 實驗記錄

• 每次測定應詳細記錄波長、樣品編號、吸光度值。

• 對關鍵實驗，應保存光譜數(shù)據(jù)文件以便復查。

3. 人員培訓

• 使用人員必須經(jīng)過培訓，熟悉儀器原理與操作規(guī)程。

• 不得由未經(jīng)授權(quán)的人員私自操作或拆卸儀器。

八、應用案例中的注意要點

案例一：核酸檢測

• 注意比色皿使用石英材質(zhì)；

• 檢測前避免 RNA 降解；

• A260/A280 比值應在 1.8–2.0。

案例二：蛋白質(zhì)定量

• 若采用紫外吸收法，避免緩沖液中含有吸收干擾物；

• 若采用染料法，應在標準曲線濃度范圍內(nèi)測定。

案例三：酶動力學實驗

• 溫度控制至關重要；

• 實驗過程中保持恒溫，避免反應速率波動。

案例四：細胞生長曲線

• 在 OD600 測定時，必須輕柔混勻培養(yǎng)液；

• 防止細胞沉淀導致數(shù)據(jù)失真。

九、未來發(fā)展與優(yōu)化方向

1. 自動化升級

• 與自動進樣系統(tǒng)結(jié)合，減少人工誤差。

1. 信息化管理

• 數(shù)據(jù)可直接上傳至實驗室管理系統(tǒng)，實現(xiàn)追溯與共享。

1. 智能診斷

• 儀器具備自我診斷功能，自動提醒光源壽命與校準情況。

總結(jié)

賽默飛分光光度計 BioMate 160 在科研與教學中發(fā)揮著重要作用。要確保實驗結(jié)果準確可靠，必須在 環(huán)境條件、樣品準備、操作細節(jié)、維護保養(yǎng)、安全規(guī)范 等方面嚴格遵循使用注意事項。只有通過規(guī)范化管理和科學化操作，才能最大程度發(fā)揮該儀器的性能，為科研和應用提供有力支持。