賽默飛分光光度計(jì) BioMate 160 操作指南

一、前言

分光光度法是分析化學(xué)和生命科學(xué)中最常見的檢測方法之一，能夠通過物質(zhì)對特定波長光的吸收情況來進(jìn)行定量和定性分析。賽默飛分光光度計(jì) BioMate 160 是一款集精確性、穩(wěn)定性與易操作性于一體的 UV-Vis 分光光度計(jì)，被廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)藥、食品檢測、環(huán)境監(jiān)測和材料科學(xué)等領(lǐng)域。

要想發(fā)揮 BioMate 160 的最大性能，必須掌握科學(xué)規(guī)范的操作方法。本指南將為用戶提供完整的操作流程，從設(shè)備準(zhǔn)備、參數(shù)設(shè)置到數(shù)據(jù)處理，結(jié)合常見問題解決與維護(hù)保養(yǎng)，幫助用戶快速熟悉并高效使用該設(shè)備。

二、設(shè)備概述

BioMate 160 采用紫外-可見光檢測原理，波長覆蓋范圍為 190–1100 nm，能夠完成核酸、蛋白質(zhì)、酶學(xué)反應(yīng)以及化學(xué)物質(zhì)的光譜分析。其主要特點(diǎn)包括：

1. 光學(xué)性能穩(wěn)定：采用氘燈和鎢燈雙光源，保障全波段檢測能力。

2. 多功能檢測模式：支持定量分析、波長掃描、動(dòng)力學(xué)測定、多波長測試。

3. 軟件界面直觀：菜單化操作設(shè)計(jì)，支持多種數(shù)據(jù)格式導(dǎo)出。

4. 數(shù)據(jù)可靠性高：具備基線校正、曲線擬合與背景扣除功能。

三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備工作

在操作 BioMate 160 之前，需做好以下準(zhǔn)備：

1. 設(shè)備檢查

• 確認(rèn)電源接通，電源線與保險(xiǎn)絲完好。

• 打開比色皿倉，檢查是否有灰塵或殘留液體。

• 檢查光源壽命，若使用時(shí)間過長，應(yīng)提前準(zhǔn)備備用燈。

2. 實(shí)驗(yàn)環(huán)境

• 保持實(shí)驗(yàn)室溫度 20–25℃，濕度 40–60%。

• 避免陽光直射與強(qiáng)磁場干擾。

• 保持操作臺(tái)整潔，防止試劑濺入樣品倉。

3. 試劑與耗材

• 配制合適的緩沖液與標(biāo)準(zhǔn)溶液。

• 檢查比色皿是否清潔透明。

• 準(zhǔn)備移液器、吸頭等常用耗材。

四、操作步驟

1. 開機(jī)與初始化

1. 接通電源，打開儀器開關(guān)。

2. 等待系統(tǒng)自檢，確認(rèn)光源與光路無異常。

3. 預(yù)熱 15–30 分鐘，保證光源穩(wěn)定。

2. 軟件登錄與模式選擇

1. 打開配套軟件，選擇用戶身份進(jìn)入主界面。

2. 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇相應(yīng)模塊：

• 定量分析：核酸、蛋白濃度測定。

• 波長掃描：繪制吸收光譜。

• 動(dòng)力學(xué)：檢測反應(yīng)隨時(shí)間的變化。

• 多波長測試：同時(shí)檢測多個(gè)波長。

3. 樣品與對照設(shè)置

1. 將比色皿或微量檢測附件放入樣品倉。

2. 使用緩沖液或空白對照作為 baseline，點(diǎn)擊“調(diào)零”。

3. 逐一放入待測樣品，點(diǎn)擊“開始測量”。

4. 參數(shù)設(shè)置

• 波長范圍：如 200–800 nm。

• 掃描速度：可選擇快速、中速、慢速。

• 積分時(shí)間：延長積分時(shí)間可提高信噪比。

• 采樣間隔：動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)需合理設(shè)置間隔。

5. 數(shù)據(jù)采集與保存

1. 軟件自動(dòng)顯示吸光度曲線或表格數(shù)據(jù)。

2. 對結(jié)果可進(jìn)行平滑、擬合或基線校正。

3. 保存為 CSV、TXT、PDF 等格式，或直接打印報(bào)告。

五、數(shù)據(jù)處理與分析

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線法

• 在定量模塊中輸入標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，繪制吸光度-濃度曲線。

• 系統(tǒng)自動(dòng)計(jì)算相關(guān)系數(shù)，并用于未知樣品濃度換算。

2. 核酸純度判定

• 通過 A260/A280 比值判斷純度：1.8–2.0 表示較高純度。

3. 蛋白質(zhì)測定

• 紫外法：280 nm 吸收峰直接計(jì)算濃度。

• Bradford 法：595 nm 測定，結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線換算。

4. 動(dòng)力學(xué)分析

• 通過曲線斜率計(jì)算酶活性或反應(yīng)速率。

5. 多波長比較

• 同時(shí)獲得多個(gè)波長的吸收值，用于復(fù)雜體系定量或雜質(zhì)判定。

六、常見問題與解決方法

1. 吸光度值過高

• 樣品濃度過大，需稀釋后重測。

2. 基線漂移

• 光源老化或溫度不穩(wěn)，應(yīng)更換光源或延長預(yù)熱。

3. 重復(fù)性差

• 可能因比色皿未清潔、移液誤差或樣品混勻不足。

4. 軟件無法連接儀器

• 檢查 USB 連接線和驅(qū)動(dòng)程序。

5. 曲線噪聲大

• 適當(dāng)延長積分時(shí)間，降低掃描速度。

七、維護(hù)與保養(yǎng)

1. 光源維護(hù)

• 定期檢查使用時(shí)間，超過壽命需及時(shí)更換。

2. 比色皿管理

• 使用后立即清洗并烘干，避免殘留影響。

3. 光路清潔

• 使用無水乙醇與無塵布定期擦拭光路窗片。

4. 軟件升級

• 定期檢查更新，獲取最新功能與補(bǔ)丁。

5. 存儲(chǔ)管理

• 定期備份實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，避免丟失。

八、典型應(yīng)用案例

案例一：DNA 濃度檢測

• 在 260 nm 下測定吸光度。

• 軟件自動(dòng)換算 DNA 濃度，并結(jié)合 A260/A280 判斷純度。

案例二：蛋白質(zhì)定量

• 使用 Bradford 顯色法，在 595 nm 下測定吸光度。

• 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，換算未知樣品濃度。

案例三：酶活性測定

• 設(shè)置動(dòng)力學(xué)模式，采樣間隔 10 秒，總時(shí)長 10 分鐘。

• 曲線斜率即為反應(yīng)速率。

案例四：化學(xué)物質(zhì)鑒別

• 在 200–800 nm 范圍內(nèi)掃描，識(shí)別特征吸收峰。

九、總結(jié)

賽默飛 BioMate 160 分光光度計(jì)具備 操作簡便、功能齊全、數(shù)據(jù)可靠 等優(yōu)勢。通過嚴(yán)格遵循操作指南，用戶可以快速完成從樣品準(zhǔn)備、參數(shù)設(shè)置到數(shù)據(jù)分析的全流程，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與可重復(fù)性。

• 在操作過程中，應(yīng)注重 對照設(shè)置、樣品處理與參數(shù)調(diào)整，避免因操作不當(dāng)帶來的誤差。

• 在維護(hù)方面，應(yīng)堅(jiān)持 光源管理、比色皿清潔、數(shù)據(jù)備份，保障設(shè)備長期穩(wěn)定運(yùn)行。

• 在應(yīng)用方面，BioMate 160 不僅能滿足常規(guī)的核酸與蛋白質(zhì)檢測，還可擴(kuò)展至環(huán)境檢測與材料科學(xué)研究，具有廣泛適用性。

通過科學(xué)規(guī)范的使用和管理，BioMate 160 將成為實(shí)驗(yàn)室中可靠的分析工具，為科研和檢測工作提供高效支持。