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伯樂Gene Pulser Xcell電穿孔儀是伯樂公司研制的高性能電穿孔系統(tǒng)，專為基因轉(zhuǎn)化、蛋白導入、RNA電轉(zhuǎn)及細胞融合等實驗設(shè)計。
設(shè)備采用可控高壓脈沖技術(shù)，使細胞膜短暫形成可逆性納米孔洞，從而實現(xiàn)外源分子進入細胞的過程。
主要特點：
輸出電壓范圍寬：10–3000 V；
支持指數(shù)波與方波兩種模式；
電容范圍25–3275 μF，可精確控制時間常數(shù)；
內(nèi)置電弧保護系統(tǒng)，防止樣品擊穿；
參數(shù)可儲存、調(diào)用與復制，便于重復實驗；
模塊化設(shè)計，支持細菌、酵母、植物原生質(zhì)體及動物細胞等多類型實驗；
配備安全互鎖系統(tǒng)與溫度保護裝置。
電穿孔（Electroporation）是通過施加瞬間高電壓脈沖改變細胞膜通透性，使帶電分子（DNA、RNA、蛋白質(zhì)）進入細胞內(nèi)的一種物理方法。
當外加電場強度達到一定閾值時，細胞膜上的磷脂分子重新排列形成暫時性孔洞；
孔洞形成后，外源物質(zhì)可自由擴散進入細胞；
移除電場后，膜孔在短時間內(nèi)自我修復，保持細胞活性。
公式表達：
電場強度 E=V/dE = V/dE=V/d，其中V為電壓，d為電極間距。
時間常數(shù) τ=RC\tau = RCτ=RC，反映放電持續(xù)時間。
通過調(diào)節(jié)V、R、C三者，可以精確控制穿孔效果與細胞存活率。
主機控制單元（Main Unit）
控制電壓、電容、電阻及波形輸出，帶有顯示屏與操作面板。
模塊系統(tǒng)（Modules）
PC模塊（Pulse Controller）：適合指數(shù)波放電（細菌、酵母、植物細胞）；
CE模塊（Capacitor Extender）：用于方波放電（動物細胞）。
ShockPod電擊槽
用于放置電穿孔杯（cuvette），連接高壓輸出端。
顯示面板與按鍵區(qū)
可設(shè)置電壓、電容、電阻、脈沖次數(shù)等參數(shù)，并實時顯示運行狀態(tài)。
安全系統(tǒng)
包括電弧檢測、電極互鎖、防過載及過溫保護功能。
電源與接地裝置
提供穩(wěn)定電流，確保安全運行。
室溫15–30℃；
濕度≤70%，無冷凝；
避免陽光直射與強電磁干擾；
使用獨立接地的交流電源（220V，50Hz）；
放置在平穩(wěn)、防震、防潮的實驗桌上。
將主機放置平穩(wěn)；
將ShockPod電擊槽插入主機前面接口；
若需方波實驗，連接CE模塊；
插入電源線并接地；
開機后系統(tǒng)自檢，顯示“System OK”即可使用。
電極表面干凈、無氧化；
電擊槽蓋可正常閉合；
電源指示燈正常亮起；
顯示屏參數(shù)清晰。
細胞預處理
使用對數(shù)期活性細胞；
低溫離心，去除培養(yǎng)基鹽分；
用無離子甘油或電穿孔緩沖液洗滌三次；
保持4℃預冷，防止電擊升溫。
DNA/RNA樣品
純度高，OD260/280≈1.8；
避免鹽和酒精殘留；
濃度一般為1–5 μg/mL。
電擊杯準備
選擇適當間距（0.1 cm、0.2 cm、0.4 cm）；
加入40–80 μL混合樣品；
避免產(chǎn)生氣泡；
保持杯體干凈、干燥。
根據(jù)實驗類型調(diào)整電壓、電容、電阻及波形。
| 實驗類型 | 模式 | 電壓(V) | 電容(μF) | 間距(cm) | 備注 |
|---|---|---|---|---|---|
| 大腸桿菌 | 指數(shù)波 | 1800–2500 | 25 | 0.2 | 甘油緩沖液 |
| 酵母 | 指數(shù)波 | 1200–1500 | 200 | 0.2 | 山梨醇保護 |
| 動物細胞 | 方波 | 250–800 | 1000 | 0.4 | 低電導緩沖液 |
| 植物原生質(zhì)體 | 指數(shù)波 | 300–700 | 500 | 0.4 | 冷卻操作 |
設(shè)定方法：
按“Menu”進入主菜單；
選擇“Manual”或“Preset”；
輸入電壓、電容、電阻；
選擇脈沖次數(shù)與間隔時間；
保存方案或直接運行。
將裝好樣品的電擊杯放入ShockPod槽中；
關(guān)閉防護蓋；
按“Pulse”鍵啟動；
屏幕顯示電壓、時間常數(shù)、脈沖曲線；
電擊結(jié)束后，系統(tǒng)自動放電；
打開蓋子，取出電擊杯；
立即將樣品轉(zhuǎn)入復蘇培養(yǎng)基中。
注意： 每次電擊后應間隔30秒以上再進行下一次操作。
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