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質(zhì)保3年只換不修，廠家長沙實(shí)了個(gè)驗(yàn)儀器制造有限公司

一、儀器簡介

伯樂電穿孔儀 165-2660 是一款高性能的生物電轉(zhuǎn)化設(shè)備，專為基因?qū)?、?xì)胞融合及分子遞送實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。
其原理是通過高壓脈沖使細(xì)胞膜瞬時(shí)形成可逆性微孔，外源 DNA、RNA 或蛋白分子即可進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部，從而實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染。

該設(shè)備具有高電壓精度、波形穩(wěn)定、操作簡便和安全保護(hù)完善的特點(diǎn)，適用于細(xì)菌、酵母、真核細(xì)胞及植物原生質(zhì)體的分子生物學(xué)研究。

二、技術(shù)參數(shù)

三、結(jié)構(gòu)組成

伯樂電穿孔儀 165-2660 采用模塊化設(shè)計(jì)，結(jié)構(gòu)清晰，便于維護(hù)和擴(kuò)展。

1. 主機(jī)部分

包括高壓發(fā)生器、電容組、放電控制模塊、電源系統(tǒng)和微處理器控制單元，是整個(gè)儀器的核心。

2. ShockPod 電擊槽

用于容納電擊杯并完成高壓放電過程，內(nèi)置電極接觸端與蓋鎖安全檢測裝置。

3. 模塊系統(tǒng)

可根據(jù)實(shí)驗(yàn)類型選擇 CE 模塊（電容擴(kuò)展）或 PC 模塊（方波控制），實(shí)現(xiàn)多種電擊模式。

4. 操作面板

包括 LCD 顯示屏、方向鍵、功能鍵（MENU、ENTER、SAVE、PULSE）等，用于參數(shù)設(shè)置與數(shù)據(jù)讀取。

5. 安全系統(tǒng)

內(nèi)置多重安全機(jī)制：蓋鎖檢測、過壓保護(hù)、過溫報(bào)警、自動(dòng)放電及電弧防護(hù)。

四、原理簡述

當(dāng)電場強(qiáng)度達(dá)到細(xì)胞膜擊穿閾值時(shí)，膜兩側(cè)電位差導(dǎo)致脂質(zhì)雙層重排，形成可逆微孔。外源分子在電場作用下進(jìn)入細(xì)胞，隨后細(xì)胞膜自我修復(fù)。

關(guān)鍵參數(shù)：

• 電壓與電場強(qiáng)度決定穿孔效果；

• 電容決定能量釋放速度；

• 電阻與時(shí)間常數(shù)決定放電波形；

• 波形類型影響細(xì)胞響應(yīng)特性。

科學(xué)控制這些參數(shù)即可實(shí)現(xiàn)高效、穩(wěn)定的電穿孔實(shí)驗(yàn)。

五、使用環(huán)境要求

• 溫度：20–25℃；

• 濕度：30–60%；

• 工作臺需平整、防震、干燥；

• 電源穩(wěn)定且接地良好（接地電阻 ≤ 1 Ω）；

• 環(huán)境無腐蝕性氣體、強(qiáng)磁場及水汽；

• 不可與高功率設(shè)備共線使用。

六、開機(jī)與初始化

1. 確認(rèn)電源線和接地線連接牢固；

2. 檢查 ShockPod 內(nèi)部干燥清潔；

3. 插入模塊（CE 或 PC），確認(rèn)卡扣到位；

4. 打開電源開關(guān)，儀器自動(dòng)執(zhí)行系統(tǒng)自檢；

5. 自檢通過后，顯示“READY”進(jìn)入主界面。

若出現(xiàn)錯(cuò)誤代碼，應(yīng)根據(jù)提示排查（如蓋鎖未閉合、電壓異常、風(fēng)扇停轉(zhuǎn)等）。

七、參數(shù)設(shè)置

儀器提供三種工作模式，操作人員可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求靈活選擇。

1. 預(yù)設(shè)模式（Preset Protocol）

內(nèi)置多種常用細(xì)胞類型的推薦參數(shù)。

• 進(jìn)入主菜單 → 選擇“Preset Protocol”；

• 選擇目標(biāo)細(xì)胞類型（如 E. coli、Yeast、CHO 等）；

• 系統(tǒng)自動(dòng)載入?yún)?shù)。

2. 手動(dòng)模式（Manual Setup）

用戶可自定義所有參數(shù)。

• 電壓：10–3000 V；

• 電容：25–3275 μF；

• 電阻：50–1000 Ω 或 ∞；

• 波形：方波 / 指數(shù)衰減波；

• 脈沖次數(shù)：1–10 次；

• 系統(tǒng)自動(dòng)顯示時(shí)間常數(shù)。

3. 用戶程序模式（User Program）

保存常用實(shí)驗(yàn)方案，最多可存儲 99 組參數(shù)。
路徑：MENU → User Program → Save/Load。

八、運(yùn)行方法

1. 樣品準(zhǔn)備

1. 使用健康、活性良好的對數(shù)生長期細(xì)胞；

2. 洗滌細(xì)胞以去除高鹽培養(yǎng)基；

3. 使用低鹽緩沖液（如無離子 PBS）；

4. 重懸濃度：

• 細(xì)菌：1×10? cells/mL；

• 酵母：1×10? cells/mL；

• 哺乳動(dòng)物細(xì)胞：1×10?–1×10? cells/mL；

5. 加入 DNA/RNA 溶液并輕輕混勻；

6. 將樣品與電擊杯一同在冰上預(yù)冷 5 分鐘。

2. 加樣與裝杯

• 將約 80% 容積樣品加入電擊杯；

• 輕敲杯壁排除氣泡；

• 放入 ShockPod 內(nèi)槽，確認(rèn)電極接觸良好；

• 關(guān)閉上蓋，聽到“咔噠”聲即表示鎖定。

3. 放電操作

1. 按 “PULSE” 鍵啟動(dòng)充電；

2. 顯示屏提示 “CHARGING…”；

3. 當(dāng)提示 “READY TO PULSE” 時(shí)按 “ENTER”；

4. 放電完成后屏幕顯示電壓、時(shí)間常數(shù)和能量釋放值；

5. 放電結(jié)束后等待“COMPLETE”提示再開蓋。

4. 樣品恢復(fù)

放電后立即將樣品轉(zhuǎn)移至恢復(fù)培養(yǎng)基中，按實(shí)驗(yàn)類型培養(yǎng)：

• 細(xì)菌：37℃，30 分鐘；

• 酵母：30℃，60 分鐘；

• 哺乳動(dòng)物細(xì)胞：37℃，1–2 小時(shí)。

九、安全操作規(guī)范

1. 放電前必須確保蓋鎖閉合；

2. 實(shí)驗(yàn)時(shí)不得接觸 ShockPod、電擊杯或連接線；

3. 禁止使用含鹽或高導(dǎo)電緩沖液；

4. 每次放電間隔至少 10 秒；

5. 若出現(xiàn)電弧或異味，應(yīng)立即斷電；

6. 使用穩(wěn)壓電源，避免電壓波動(dòng)；

7. 嚴(yán)禁私自拆解或改裝儀器；

8. 放電時(shí)人員應(yīng)遠(yuǎn)離金屬器具；

9. 保持 ShockPod 干燥，防止漏電；

10. 電源線、保險(xiǎn)絲應(yīng)由專業(yè)人員更換。

十、數(shù)據(jù)記錄與導(dǎo)出

1. 自動(dòng)記錄

每次實(shí)驗(yàn)后系統(tǒng)自動(dòng)保存：

• 放電電壓（Vout）；

• 時(shí)間常數(shù)（τ）；

• 電阻（Ω）；

• 能量釋放比例（%Energy）；

• 日期與編號。

2. 導(dǎo)出方法

• 插入 USB 存儲設(shè)備；

• 進(jìn)入菜單“Data Export”；

• 選擇格式（CSV 或 TXT）；

• 文件自動(dòng)生成，可導(dǎo)入電腦分析。

十一、常見問題及排除

十二、日常維護(hù)與保養(yǎng)

1. 每次使用后

• 關(guān)閉電源并拔下插頭；

• 用無水乙醇擦拭外殼和操作面板；

• 清潔 ShockPod 內(nèi)槽并晾干；

• 電擊杯沖洗干凈后放回包裝盒。

2. 每周檢查

• 檢查電源線、風(fēng)扇、接地線；

• 清理通風(fēng)口灰塵；

• 檢查電極表面有無氧化。

3. 每月維護(hù)

• 測試電壓輸出精度；

• 校正時(shí)間常數(shù)；

• 檢查模塊插口是否松動(dòng)。

4. 每年維護(hù)

• 由專業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行高壓系統(tǒng)檢測與軟件升級；

• 更換風(fēng)扇濾網(wǎng)與老化部件。

十三、存放與運(yùn)輸

• 存放環(huán)境溫度 10–30℃，濕度 30–60%；

• 環(huán)境干燥通風(fēng)，遠(yuǎn)離腐蝕性化學(xué)品；

• 不可堆放重物在設(shè)備上方；

• 長期停用時(shí)覆蓋防塵罩；

• 每月通電運(yùn)行 5 分鐘保持系統(tǒng)活性；

• 運(yùn)輸時(shí)使用原包裝箱并保持水平。

十四、實(shí)驗(yàn)優(yōu)化建議

1. 電壓控制：電壓過低轉(zhuǎn)化率低，過高則細(xì)胞死亡，應(yīng)逐級優(yōu)化；

2. 電容選擇：大電容延長能量釋放時(shí)間，有利于真核細(xì)胞轉(zhuǎn)化；

3. 波形調(diào)整：細(xì)菌適用指數(shù)衰減波，真核細(xì)胞適用方波；

4. 預(yù)冷操作：樣品與電擊杯預(yù)冷 4℃ 提高存活率；

5. 多脈沖策略：真核細(xì)胞使用 2–3 次低電壓脈沖可提升導(dǎo)入率；

6. 恢復(fù)時(shí)間：電擊后及時(shí)轉(zhuǎn)入培養(yǎng)基，有助于細(xì)胞修復(fù)。

十五、性能驗(yàn)證與校準(zhǔn)

為保證設(shè)備長期準(zhǔn)確運(yùn)行，應(yīng)定期執(zhí)行以下校驗(yàn)：

每半年應(yīng)進(jìn)行一次完整校準(zhǔn)，并保存校準(zhǔn)報(bào)告。

十六、安全警示

• 儀器屬高壓設(shè)備，嚴(yán)禁私自拆卸；

• 放電后需等待 5 秒再取出樣品；

• 操作時(shí)禁止飲食及攜帶液體；

• 不得在潮濕環(huán)境下開機(jī)；

• 發(fā)現(xiàn)異味或異常聲響應(yīng)立即斷電；

• 嚴(yán)禁非專業(yè)人員維修。

十七、附錄：操作流程簡要

1. 檢查設(shè)備與樣品準(zhǔn)備；

2. 開機(jī)并完成系統(tǒng)自檢；

3. 選擇模式與設(shè)置參數(shù)；

4. 加樣并放入 ShockPod；

5. 蓋緊上蓋并確認(rèn)鎖定；

6. 執(zhí)行放電（PULSE）；

7. 記錄電壓與時(shí)間常數(shù)；

8. 轉(zhuǎn)移樣品恢復(fù)培養(yǎng)；

9. 清潔儀器與電擊杯；

10. 關(guān)閉電源、導(dǎo)出數(shù)據(jù)。