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伯樂1652100電穿孔儀是一款專為基因轉(zhuǎn)染實驗設(shè)計的高精度電穿孔系統(tǒng)，適用于將外源DNA、RNA、蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)導(dǎo)入各種哺乳動物細胞、細菌、酵母、昆蟲細胞及植物細胞中。該設(shè)備基于脈沖電場原理，通過短時間高電壓使細胞膜暫時形成“納米孔”，從而實現(xiàn)分子導(dǎo)入。
伯樂1652100系統(tǒng)具有電壓精度高、波形選擇靈活、細胞適應(yīng)性強等優(yōu)點，是細胞轉(zhuǎn)染實驗中常用的標準設(shè)備之一。
主控電源模塊（Gene Pulser Xcell Main Unit）：調(diào)節(jié)電壓、電容、電阻及脈沖持續(xù)時間等關(guān)鍵參數(shù)。
ShockPod電極模塊：用于細胞懸液與電場接觸的核心反應(yīng)區(qū)域。
顯示界面與操作面板：設(shè)置與顯示脈沖參數(shù)，包括波形、電壓、電阻、電容等。
連接線纜：連接主機與電極模塊。
電穿孔是通過瞬間高壓電場改變細胞膜通透性，使目標分子能夠快速進入細胞質(zhì)甚至細胞核。設(shè)備可輸出方波（square wave）或指數(shù)衰減波（exponential decay wave），針對不同類型細胞和分子調(diào)節(jié)參數(shù)，達到最佳轉(zhuǎn)染效率。
細胞狀態(tài)：選擇對數(shù)生長期的細胞，活力高、密度適中（如10?~10?/mL）；
洗滌細胞：使用無鈣無鎂的PBS或?qū)Ｓ秒姶┛拙彌_液（低電導(dǎo)）反復(fù)洗滌，避免電流短路；
混合外源物質(zhì)：將待轉(zhuǎn)染的DNA、RNA或蛋白質(zhì)與細胞混合，體積控制在100–400 μL；
轉(zhuǎn)移至穿孔杯：將混合液轉(zhuǎn)移至預(yù)冷穿孔杯（cuvette），常用電極間距為0.2 cm或0.4 cm。
將穿孔杯插入ShockPod模塊；
ShockPod通過專用連接線與主機連接；
打開設(shè)備，進入主界面，選擇適配模式（如Bacteria、Mammalian、Yeast等）；
設(shè)置穿孔參數(shù)（以指數(shù)衰減波為例）：
電壓（V）：100–2500V，取決于細胞類型；
電容（μF）：常見值1–1000μF；
電阻（Ω）：設(shè)定為并聯(lián)或開放回路，通常用于調(diào)整時間常數(shù)；
波形：Exponential decay 或 Square wave；
脈沖數(shù)：1 或多次（可手動或自動控制）。
點擊“Pulse”按鈕，設(shè)備即刻釋放電壓；
屏幕顯示“Time constant”或“Pulse width”，代表脈沖實際作用時間；
完成后立即取出穿孔杯，將細胞輕柔轉(zhuǎn)入溫和培養(yǎng)基中進行復(fù)蘇。
將復(fù)蘇后的細胞置于培養(yǎng)板中繼續(xù)孵育；
6–24小時后可檢測目標分子的表達情況（如熒光標記、PCR、Western Blot等）。
| 細胞類型 | 電壓(V) | 電容(μF) | 間距(cm) | 波形 |
|---|---|---|---|---|
| 大腸桿菌 | 1800–2500 | 25 | 0.2 | 指數(shù)衰減波 |
| 酵母 | 1500–2000 | 25 | 0.2 | 指數(shù)衰減波 |
| 小鼠B細胞 | 300–350 | 950 | 0.4 | 指數(shù)衰減波 |
| CHO細胞 | 250–300 | 500 | 0.4 | 指數(shù)衰減波 |
| NIH-3T3 | 250–300 | 500 | 0.4 | 指數(shù)衰減波 |
| 植物原生質(zhì)體 | 500–1500 | 50–250 | 0.4 | 方波 |
注：以上參數(shù)僅供參考，需根據(jù)實際實驗條件微調(diào)優(yōu)化。
避免使用含有高鹽或血清的培養(yǎng)基進行電穿孔操作，推薦使用低電導(dǎo)緩沖體系，如HEPES、cytomix、Opti-MEM等。
杯子必須干凈無裂紋；
使用前預(yù)冷至4°C；
每次使用后徹底清洗或更換，避免交叉污染。
電壓與電極間距成正比；
同一種細胞，間距不同，所需電壓亦需調(diào)整。
高密度、老化或狀態(tài)不佳的細胞會顯著降低轉(zhuǎn)染效率并提高死亡率。使用對數(shù)生長期、單細胞懸液效果最佳。
| 問題描述 | 原因分析 | 解決辦法 |
|---|---|---|
| 無電壓輸出 | 電極連接不良 / 杯內(nèi)液體過少 | 檢查ShockPod插接 / 增加液體體積 |
| 細胞全部死亡 | 電壓過高 / 電容過大 / 操作時間延遲 | 降低參數(shù) / 加快復(fù)蘇步驟 |
| 穿孔不成功 | 電壓過低 / 波形不適 / 杯有污染 | 調(diào)整參數(shù) / 更換杯 / 檢查DNA質(zhì)量 |
| 電極間放電 | 液體溢出電極間隙 | 檢查穿孔杯是否液面過高 |
| 時間常數(shù)為0 | 液體導(dǎo)電性過強（如PBS含鈣鎂） | 更換為低導(dǎo)電緩沖液 |
清潔穿孔杯與ShockPod模塊；
檢查電極是否被腐蝕或氧化；
液體潑濺部位要及時用酒精棉擦拭清潔。
檢查面板按鈕、連接線接口是否老化；
查看電容參數(shù)調(diào)節(jié)是否準確；
運行自檢程序確保輸出電壓穩(wěn)定。
可通過連接電腦或設(shè)備接口，獲取廠商更新程序提升精度與穩(wěn)定性。
伯樂1652100支持在同一實驗中施加連續(xù)多波段穿孔波形（如雙脈沖策略），可提高較難轉(zhuǎn)染細胞的成功率。
設(shè)備可自動保存電穿孔數(shù)據(jù)（如時間常數(shù)、電壓、電流等），便于實驗追蹤與重現(xiàn)。
可搭配伯樂的多通道穿孔系統(tǒng)（如96孔穿孔板），實現(xiàn)大規(guī)模轉(zhuǎn)染實驗，適用于基因篩選與藥物轉(zhuǎn)導(dǎo)。
穿孔過程中高壓釋放，請勿觸碰ShockPod區(qū)域；
若聞異味或聽到異常聲音，請立即斷電檢查；
嚴禁在潮濕環(huán)境中操作主機；
液體濺入設(shè)備需立即擦干，必要時聯(lián)系維修人員。
伯樂1652100電穿孔儀是一款高效、安全、靈活的電穿孔轉(zhuǎn)染平臺，能夠滿足多種實驗需求。從細菌、酵母到哺乳動物細胞，再到植物原生質(zhì)體，均可通過合理設(shè)置參數(shù)實現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染。通過規(guī)范操作流程、科學參數(shù)設(shè)定、細致維護保養(yǎng)，使用者可以大幅提升轉(zhuǎn)染效率與實驗重復(fù)性。
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