伯樂(Bio-Rad)MicroPulser? 電穿孔儀1652100 是一款專為分子生物學實驗室設(shè)計的電轉(zhuǎn)化設(shè)備,廣泛用于將外源DNA、RNA 或質(zhì)粒引入到細菌、酵母、哺乳動物細胞和植物細胞等多種細胞中。該設(shè)備以其高效率、精準控制和多功能性,在生命科學研究中發(fā)揮著重要作用,是細胞轉(zhuǎn)染、電融合及基因編輯等實驗的常用工具。
電轉(zhuǎn)化(Electroporation)是一種通過短時間高壓電脈沖形成細胞膜暫時孔道的方法,使得帶負電荷的核酸分子可以在電場作用下穿過細胞膜進入細胞內(nèi)部。該過程不依賴載體或化學試劑,具有操作簡便、轉(zhuǎn)化效率高等優(yōu)點,尤其適用于傳統(tǒng)轉(zhuǎn)染法難以處理的細菌或原核細胞。
電場作用下,細胞膜兩側(cè)形成瞬時電壓差,引發(fā)膜電位升高并形成納米級孔洞。在外源DNA濃度適宜的情況下,這些分子便可借助電勢差進入細胞質(zhì)中。一旦脈沖結(jié)束,細胞膜恢復(fù)完整,部分轉(zhuǎn)化成功的細胞便獲得新的基因表達能力。
伯樂1652100 MicroPulser 電穿孔儀的整體結(jié)構(gòu)由以下幾部分組成:
主機內(nèi)置高壓脈沖發(fā)生器和智能控制芯片,可輸出穩(wěn)定、重復(fù)性強的電信號,確保實驗條件的一致性。液晶顯示屏提供實時的參數(shù)反饋,方便操作人員調(diào)節(jié)。
設(shè)備內(nèi)置多種標準電轉(zhuǎn)化程序,針對不同細胞類型(如大腸桿菌、酵母、CHO細胞)預(yù)設(shè)最優(yōu)電壓、電容、電阻等參數(shù),用戶也可自定義新程序。
配合專用電擊杯(0.1 cm、0.2 cm、0.4 cm電極間隙),實現(xiàn)電場均勻分布,提高穿孔均勻性與生存率。
內(nèi)置過電壓、過電流保護裝置,在發(fā)生異常時自動切斷輸出,避免樣本和設(shè)備損壞。
| 項目 | 參數(shù)說明 |
|---|---|
| 電壓范圍 | 200–3000 V |
| 電壓增量 | 10 V |
| 時間常數(shù)范圍 | 0.1–5 ms(取決于負載) |
| 支持電擊杯規(guī)格 | 0.1 cm、0.2 cm、0.4 cm |
| 輸出波形 | 指數(shù)衰減型脈沖(Exponential Decay) |
| 顯示屏 | 背光LCD液晶 |
| 重復(fù)性 | ±2%(取決于杯中電阻) |
| 尺寸與重量 | 22 x 18 x 9 cm,約3 kg |
| 電源要求 | 100–240 V,50/60 Hz |
支持精細電壓調(diào)節(jié)(每次遞增10 V),適應(yīng)不同類型細胞的電穿孔閾值要求;重復(fù)性優(yōu)異,適合數(shù)據(jù)重現(xiàn)性要求高的實驗場景。
通過預(yù)設(shè)程序可一鍵完成轉(zhuǎn)化操作,適合初學者與高通量實驗操作,提升實驗效率。
廣泛支持原核與真核細胞,包括但不限于:
大腸桿菌
金黃色葡萄球菌
釀酒酵母
哺乳動物細胞(如CHO、HEK293)
植物原生質(zhì)體
設(shè)備帶有完善的故障保護與溫控模塊,防止誤操作及高溫造成樣本死亡。
低功耗設(shè)計,適合實驗室持續(xù)運行環(huán)境。
重組菌株構(gòu)建:將質(zhì)粒導入細菌,實現(xiàn)外源蛋白表達。
基因突變實驗:用于CRISPR-Cas9系統(tǒng)轉(zhuǎn)入細胞。
疫苗研究:將抗原表達載體導入細胞系表達。
合成生物學:構(gòu)建多種合成通路并進行模塊化表達。
植物育種:轉(zhuǎn)化植物原生質(zhì)體以實現(xiàn)外源基因整合。
以大腸桿菌質(zhì)粒轉(zhuǎn)化為例:
制備感受態(tài)細胞:低溫條件下洗脫離心純凈菌體,并懸浮于無鹽甘油溶液中。
DNA混合:將適量純化質(zhì)粒DNA加入感受態(tài)細胞中,輕輕混勻。
裝入電擊杯:選用0.2 cm間距電擊杯,將混合物移入。
設(shè)置參數(shù):選擇大腸桿菌預(yù)設(shè)程序(如電壓1800 V)。
啟動電擊:按下“pulse”鍵進行穿孔。
恢復(fù)培養(yǎng):立刻加入SOC培養(yǎng)基于37°C復(fù)蘇1小時。
后續(xù)操作:涂布平板培養(yǎng),篩選陽性克隆。
滅菌處理:電擊杯及試劑必須徹底滅菌,避免污染干擾結(jié)果。
預(yù)冷操作:感受態(tài)細胞、電擊杯、電擊液必須保持冰冷狀態(tài),提升存活率。
電壓合理設(shè)置:超出建議電壓可能引起細胞死亡,影響轉(zhuǎn)化效率。
防止氣泡:液體中不得有氣泡,否則會導致電擊短路或電弧燒傷。
避免重復(fù)電擊:一次性電擊為宜,重復(fù)可能損傷細胞結(jié)構(gòu)。
| 指標 | 伯樂MicroPulser 1652100 | 其他品牌(如Eppendorf) |
|---|---|---|
| 電壓控制 | ±10 V精度,用戶自設(shè) | 通常為固定預(yù)設(shè)檔 |
| 細胞適配性 | 涵蓋全種類(原核+真核) | 部分型號局限于原核細胞 |
| 預(yù)設(shè)程序 | 多種可調(diào)+自定義存儲 | 多為固定模式,適應(yīng)性差 |
| 操作界面 | LCD數(shù)字顯示+人機交互 | 基本按鍵切換,顯示簡單 |
| 安全性 | 具備過載保護與狀態(tài)提醒 | 一般僅有限電流保護 |
| 維護性 | 配件豐富、維護簡單 | 零件價格高、維修門檻高 |
伯樂MicroPulser? 1652100 電穿孔儀作為電轉(zhuǎn)化領(lǐng)域的高端設(shè)備代表,憑借其優(yōu)秀的電壓控制能力、全面的程序設(shè)置和廣泛的適配細胞類型,成為科研實驗室和生物制藥企業(yè)的常規(guī)核心儀器。其在轉(zhuǎn)化效率、生存率、安全性及數(shù)據(jù)一致性方面的優(yōu)勢,使得科研人員能更加專注于生物構(gòu)建和下游分析,而不必反復(fù)調(diào)試穿孔條件。
隨著CRISPR等基因編輯工具的發(fā)展,對轉(zhuǎn)染效率和精確度提出更高要求,MicroPulser 的升級路徑也將圍繞“智能化控制”、“微流控接口”、“高通量自動化平臺兼容性”等方向不斷拓展,為基因工程與合成生物學提供更強有力的技術(shù)支持。



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