熒光定量PCR(Real-Time PCR)是分子生物學(xué)中一種精確、快速、靈敏的核酸檢測方法,賽默飛作為生命科學(xué)儀器領(lǐng)域的領(lǐng)先廠商,其熒光定量PCR儀憑借穩(wěn)定的性能、豐富的功能和易用性,在科研、臨床、食品安全、環(huán)境監(jiān)測等領(lǐng)域有著廣泛應(yīng)用。相比傳統(tǒng)PCR,該類儀器不僅能實現(xiàn)DNA或RNA的擴增,還能在反應(yīng)過程中實時監(jiān)測產(chǎn)物累積情況,從而獲得定量數(shù)據(jù),極大提升實驗效率與結(jié)果的可靠性。
實時熒光監(jiān)測
賽默飛熒光定量PCR儀通過在擴增反應(yīng)體系中加入熒光染料(如SYBR Green)或熒光探針(如TaqMan探針),在每個循環(huán)結(jié)束時利用高靈敏光學(xué)檢測系統(tǒng)記錄熒光信號變化。熒光強度與擴增產(chǎn)物濃度成正比,軟件會將其轉(zhuǎn)化為擴增曲線和定量數(shù)據(jù)。
高精度溫控系統(tǒng)
儀器配備先進的半導(dǎo)體熱循環(huán)系統(tǒng)(Peltier元件)與溫度傳感器,能夠在升溫和降溫過程中保持極小的溫差(通?!?.1–0.2 ℃),保證樣品間溫度一致性,這對于熒光定量的可重復(fù)性至關(guān)重要。
優(yōu)化的光學(xué)路徑設(shè)計
賽默飛的光學(xué)檢測系統(tǒng)通常采用獨立的激發(fā)光源與高性能濾光片組,結(jié)合多通道檢測模塊,可同時監(jiān)測多個熒光通道,實現(xiàn)多重檢測(Multiplex),在一次反應(yīng)中檢測不同的靶標,提高實驗通量與數(shù)據(jù)利用率。
低背景與高信噪比
光學(xué)系統(tǒng)在設(shè)計上減少了光散射和反射帶來的干擾,結(jié)合精準的濾光片與光纖耦合技術(shù),使檢測信噪比顯著提升,確保低濃度模板的檢測靈敏度。
模塊化樣品臺
儀器樣品槽多采用96孔、384孔等標準板格式,同時兼容0.2 mL反應(yīng)管和光學(xué)膜封板,適配性強。部分型號具備可更換模塊,可根據(jù)實驗需求切換不同孔數(shù)模塊。
快速升降溫能力
高性能熱循環(huán)系統(tǒng)使溫度變化速率可達5–6 ℃/秒,大幅縮短實驗時間。對于時間敏感的檢測(如病原體快速篩查),這一特性能夠顯著提高檢測效率。
多通道熒光檢測
支持多種常用熒光通道(如FAM、HEX、ROX、Cy5等),部分高端型號可擴展至六通道,實現(xiàn)多靶標同步檢測,減少樣品和試劑消耗。
直觀的觸控操作界面
新一代機型普遍采用大尺寸彩色觸控屏,配合直觀的軟件菜單,讓實驗人員無需復(fù)雜培訓(xùn)即可上手操作,參數(shù)設(shè)置、運行監(jiān)控與數(shù)據(jù)查看都更為便捷。
內(nèi)置數(shù)據(jù)分析功能
軟件可直接完成Ct值計算、相對定量、絕對定量、基因分型(Genotyping)、熔解曲線分析等功能,減少數(shù)據(jù)導(dǎo)出和二次處理的步驟。
高重復(fù)性與可比性
賽默飛熒光定量PCR儀在生產(chǎn)過程中經(jīng)過嚴格的溫度均一性與光學(xué)一致性校準,即使在不同批次、不同儀器間,也能保持數(shù)據(jù)的高度一致性,方便跨實驗室比較與多中心研究。
靈敏度與線性范圍
對低拷貝模板的檢測限可低至1–10拷貝,同時在6–8個數(shù)量級范圍內(nèi)保持良好的線性關(guān)系,適用于痕量分析和大動態(tài)范圍的定量檢測。
穩(wěn)定運行與長壽命
儀器結(jié)構(gòu)堅固,關(guān)鍵部件如Peltier模塊、光源和濾光片壽命長,經(jīng)過長時間連續(xù)運行仍能保持性能穩(wěn)定,減少維護成本和停機時間。
智能化與網(wǎng)絡(luò)功能
部分型號支持實驗方法存儲、自動生成運行報告、遠程監(jiān)控與數(shù)據(jù)云存儲,方便團隊協(xié)作與數(shù)據(jù)共享。對于多點布控的檢測機構(gòu)而言,遠程管理可顯著提高工作效率。
科研領(lǐng)域
基因表達分析:用于檢測不同條件下基因的相對表達量變化。
基因分型與突變檢測:通過特異性探針實現(xiàn)SNP分型、插入/缺失突變檢測。
病原體檢測:適用于病毒、細菌、真菌等核酸的定性與定量分析。
臨床與公共衛(wèi)生
感染病快速診斷:在疾病暴發(fā)期間,快速篩查病原體并進行病毒載量檢測。
個體化醫(yī)療:檢測患者特定基因突變或表達水平,指導(dǎo)用藥。
食品與環(huán)境檢測
食品安全:檢測轉(zhuǎn)基因成分、致病微生物污染等。
環(huán)境監(jiān)測:檢測水體、空氣中的病原體或污染物相關(guān)基因。
噪音與能耗優(yōu)化
高端型號在風(fēng)扇設(shè)計與散熱結(jié)構(gòu)上進行了優(yōu)化,運行噪音低,適合在開放實驗室環(huán)境中長時間工作。
樣品保護
在實驗意外中斷時,具備斷電保護與自動恢復(fù)功能,防止因外部因素導(dǎo)致實驗失敗。
易維護設(shè)計
光學(xué)和熱學(xué)模塊封閉性好,減少灰塵與濕氣影響;軟件提供自檢功能,便于用戶快速判斷故障并維護。
兼容多品牌耗材
樣品槽設(shè)計兼容性高,可適配多品牌光學(xué)反應(yīng)板、管和封板膜,降低耗材成本。
賽默飛熒光定量PCR儀的核心優(yōu)勢在于精準溫控、穩(wěn)定光學(xué)檢測、多通道能力、操作簡便性和高度數(shù)據(jù)處理集成。它不僅能滿足科研人員對靈敏度、穩(wěn)定性和多樣化檢測的需求,也適配臨床與工業(yè)應(yīng)用的高通量與高效率要求。其人性化設(shè)計和智能化功能進一步提升了使用體驗和實驗效率,使其在全球分子檢測領(lǐng)域保持領(lǐng)先地位。
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